Статті
Постійне посилання на розділhttps://dspace.nuft.edu.ua/handle/123456789/7372
Переглянути
3 результатів
Результати пошуку
Документ Влияние способа приготовления посевного материала на синтез экзополисахарида этаполана(2005) Пирог, Татьяна Павловна; Корж, Юлия Николаевна; Лащук, Надежда ВладимировнаИсследована зависимость уровня синтеза микробного экзополисахарида этаполана при культивировании Acinetobacter sp. на средах с различными субстратами (этанол, ацетат, глюкоза, этанол+глюкоза) от способа получения посевного материала. Увеличение синтеза ЭПС на среде с глюкозой при использовании инокулята, выращенного на этанол- или ацетатсодержащей среде, обусловлено индукцией глюконеогенеза, о чем свидетельствует повышение активности ферментов глиоксилатного цикла (изоцитратлиазы и малатсинтазы), а также ключевого фермента глюконеогенеза фосфоенолпируватсинтетазы. Применение посевного материала, выращенного с использованием ацетата, при культивировании Acinetobacter sp. В-7005 на среде, содержащей этанол или смесь этанола и глюкозы, сопровождалось устранением ограничений по включению ацетата в бактериальный метаболизм, повышением активности ацетил-КоА-синтетазы, изоцитратлиазы, малатсинтазы и увеличением синтеза ЭПС. Обсуждаются возможные механизмы повышения активности ацетил-КоА-синтетазы при использовании инокулята, выращенного на среде с ацетатом. The microbial exopolysaccharide (EPS) ethapolane synthesis by Acinelobacier sp. on different substrates (ethanol, acetate, glucose, glucose+ethanol) has been investigated as a function of a method for inoculum preparation. The increase in the EPS synthesis on a medium with glucose using the inoculum grown on ethanol or acetate was caused by the gluconeogenesis induction. This was confirmed un increase in the activities of glyoxylate cycle (isicitrate and malate synthase) and a key enzyme of gluconeogenesis, phosphoenolpyruvate synthetase Use of the inoculum grown on acetate for culturing Acinetobactei sp. on ethanol or a mixture of ethanol and glucose was accompanied with the following evidence. The limitations in acetate metabolism in the bacteria were eliminated, the activities of ace- tyl-CoA synthetase, isocitrate lyase, malate synthase grew, and the EPS synthesis augmented. Possible mechanisms of the enhanced acetyl-CoA synthetase activity using the inoculum grown or acetate are discussed.Документ Особенности C2-метаболизма и интенсификация синтеза поверхностно-активных веществ у штамма Rhodococcus erythropolis EK-1, растущего на этаноле(2008) Пирог, Татьяна Павловна; Корж, Юлия Николаевна; Шевчук, Татьяна Андреевна; Тарасенко, Д. А.Окисление этанола у штамма Rhodococcus erythropolis ЭК-1 – продуцента поверхностно-активных веществ (ПАВ), осуществляется 4-нитрозо-N,N-диметиланилин (НДМА)-зависимой алкогольдегидрогеназой, окисление ацетальдегида – НАД+- и НАДФ+-зависимыми дегидрогеназами с оптимумом рН 9.5, окисление ацетата – ацетаткиназой и ацетил-КоА-синтетазой. При росте на этаноле в клетках R. erythropolis ЭК-1 функционирует как глиоксилатный цикл, так и полный цикл трикарбоновых кислот, синтез фосфоенолпирувата (ФЕП) обеспечивается двумя ключевыми ферментами глюконеогенеза – ФЕП-карбоксикиназой и ФЕП-синтетазой. Внесение в среду культивирования R. erythropolis ЭК-1, содержащую 2 % этанола, цитрата (0.1 %) и фумарата (0.2 %) сопровождалось усилением глюконеогенеза, что подтверждается повышением в 1.5 и 3.5 раза активности изоцитратлиазы и ФЕП-синтетазы (ключевых ферментов глиоксилатного цикла и глюконеогенетической ветви обмена веществ соответственно), а также синтеза липидов, о чем может свидетельствовать снижение в 1.5 раза активности изоцитратдегидрогеназы. В присутствии фумарата и цитрата показатели синтеза ПАВ штаммом R. erythropolis ЭК-1 на этаноле повышались на 40–100 %. Oxidation of ethanol, acetaldehyde, and acetate in Rhodococcus erythropolis EK-1, producer of surface-active substances (SAS), is catalyzed by N,N-dimethyl-4-nitrosoaniline (DMNA)-dependent alcohol dehydrogenase, NAD+/NADP+-dependent dehydrogenases (optimum pH 9.5), and acetate kinase/acetyl-CoAsynthetase, respectively. The glyoxylate cycle and complete tricarboxylic acid cycle function in the cells of R. erythropolis EK-1 growing on ethanol; the synthesis of phosphoenolpyruvate (PEP) is provided by the two key enzymes of gluconeogenesis, PEP carboxykinase and PEP synthetase. Introduction of citrate (0.1%) and fumarate (0.2%) into the cultivation medium of R. erythropolis EK-1 containing 2% ethanol resulted in the 1.5- and 3.5-fold increase in the activities of isocitrate lyase and PEP synthetase (the key enzymes of the glyoxylate cycle and gluconeogenesis branch of metabolism, respectively) and of lipid synthesis, as evidenced by the 1.5-fold decrease of isocitrate dehydrogenase activity. In the presence of fumarate and citrate, the indices of SAS synthesis by strain R. erythropolis EK-1 grown on ethanol increased by 40–100%.Документ Особенности синтеза экзополисахарида этаполана на смеси энергетически дефицитных ростовых субстратов(2007) Пирог, Татьяна Павловна; Высятецкая, Надежда Владимировна; Корж, Юлия НиколаевнаПоказана возможность интенсификации синтеза микробного экзополи-сахарида этаполана (продуцент - Acinetobacter sp. В-7005) на смеси энергетически дефицитных ростовых субстратов (ацетат+глюкоза). При росте бактерий на смешанном субстрате оба субстрата потребляются одновременно, причем ацетат поглощается путем активного транспорта с использованием энергии протондвижущей силы. При наличии ацетата натрия в смешанном субстрате активность ацетил-КоА-синтетазы и ключевого фермента глюконеогенеза фосфоенолпируватсинтетазы были более, чем в 10 раз, а показатели синтеза этаполана почти в 2 раза выше по сравнению с ацетатом калия. Эти результаты могут свидетельствовать об участии Na+ в создании ионных градиентов на мембране, необходимых для генерации энергии протондвижущей силы. Одновременное функционирование глиоксилатного цикла и пируваткарбоксилазной реакции, повышение активности изоцитратлиазы, малатсинтазы и фосфоенолпируватсинтетазы свидетельствуют об усилении глюконеогенеза и изменении направленности процессов биосинтеза на смеси ацетата и глюкозы в сторону образования углеводов по сравнению с выращиванием Acinetobacter sp. В-7005 на соответствующих моносубстратах. Intensification of the synthesis of the microbial exopolysaccharide ethapolan by Acinetobacter sp. B-7005 was shown to occur on a mixture of energy-deficient growth substrates (acetate + glucose). When the bacterium grew on the substrate mixture, both substrates were utilized simultaneously; acetate was taken up by means of active transport at the expense of the energy of the proton-motive force. When acetate was present in the form of a sodium salt, the activities of acetyl-CoA synthetase and phosphoenolpyruvate synthetase (the key enzyme of gluconeogenesis) were tenfold higher than in the presence of potassium acetate, and the indexes of ethapolan synthesis were two times higher. The positive effect of Na+ on ethapolan synthesis is supposed to consist in the creation of ion gradients on the membrane, necessary for the generation of the proton-motive force. Simultaneous functioning of the glyoxylate cycle and pyruvate carboxylase reaction, as well as an increase in the activity of isocitrate lyase, malate synthase, and phosphoenolpyruvate synthetase, provide evidence of increased gluconeogenesis in the presence of the acetate + glucose mixture (as compared to gluconeogenesis on the corresponding monosubstrates).