Статті
Постійне посилання на розділhttps://dspace.nuft.edu.ua/handle/123456789/7372
Переглянути
5 результатів
Результати пошуку
Документ Синтез мікробного екзополіцукриду етаполану на суміші етанолу і меляси(2006) Пирог, Тетяна Павлівна; Корж, Юлія Миколаївна; Лащук, Надія Володимирівна; Зборовська, Б. М.Показана можливість заміни глюкози при культивуванні продуцента екзо¬поліцукриду (ЕПЦ) етаполану Acinetobacter sp. В-7005 на суміші С2-С6-сцолук на дешевший субстрат — мелясу. Найвищі показники синтезу ЕПЦ спостерігали за умови попереднього гідролізу меляси, наявності у середовищі факторів росту (дріжджового автолізату і пантотенату кальцію), відсутності мінерального джерела азотного живлення і використання посівного матеріалу, вирощеного на ацетаті. У таких умовах культивування бактерій на суміші етанолу (об. частка 0,75 %) і меляси (мас. частка 0,75 % за вуглеводами) кількість синтезованих ЕПЦ досягала 10 г/л, ЕПЦ-синтезувальна здатність — 5г ЕПЦ /г біомаси, вихід ЕПЦ бід субстрату — 74 %, що в 1,3 — 1,5 раза більше, ніж при вирощуванні на мелясі. Збільшення синтезу ЕПЦ на мелясі, а також суміші етанолу і меляси при використанні інокуляту, вирощеного на С2-субстратах (порівняно із застосуванням посівного матеріалу, одержаного на середовищі з мелясою), зумовлено індукцією глюконеогенезу, про що засвідчили зниження активності ізоцитратдегідрогенази, підвищення активності ферментів гліоксилатного циклу і ключового ферменту глюконеогенезу фосфоенолпїруватсинтетази. A possibility to change glucose, when cultivating exopolysaccharide (EPS) producer etapolan Acinetobacter sp. B-7005 on a mix of C2 —C6-compounds, by the inexpensive substrate — molasses has been shown. The highest indices of EPS synthesis were observed under the conditions of preliminary hydrolysis of molasses, availability of growth factors (yeast autholisate and calcium pantothenate) in the medium, lack of the mineral source of nitrogen nutrition and use of inoculation material grown on acetate. Ini such conditions of cultivation of bacteria on the mix of ethanol (0.75 % in volume) and molasses (0.75 wt. % as to carbohydrates) thè amount of synthesized EPS reached 10 g/1, EPS-synthesizing capacity — 5 g of EPS /g of biomass, the EPS yield from substrate — 74 % that is 1.3 —1.5 times more than in cultivation on molasses. The increase of EPS synthesis on molasses, as well as on etanol and molasses mix with the use of inoculate grown on C2 — substratès (compared with the use of inoculate obtained on the medium with molasses) is determined by the induction of gluconeogenesis that was evidence^ by the decrease of isocytrate dehydrogenase activity, increase of activity of enzymes of glyoxylate cycle and key enzyme of gluconeogenesis of phosphoenolpyruvate synthetase.Документ Особливості метаболізму під час вирощування Acinetobacter sp. В-7005 на суміші ростових С2-С6-субстратів(2007) Пирог, Тетяна Павлівна; Корж, Юлія Миколаївна; Висятецька, Надія ВолодимирівнаВстановлено, що в умовах міксотрофного росту Acinetobacter sp. В-7005 на суміші ацетату натрію і глюкози активність ацетил-КоА-синтетази і фосфоенолпіруватсинтетази були у 10 разів, а показники синтезу мікробного екзополіцукриду (ЕПЦ) етаполану майже у 2 рази нижчими, ніж на суміші ацетату калію і глюкози. Припускається, що позитивна роль катіонів натрію може полягати в їх участі у активному транспорті ацетату в клітини Acinetobacter sp. В-7005. Підвищення синтезу етаполану у разі вирощування продуцента на суміші енергетично дефіцитних (ацетат + глюкоза) і енергетично нерівноцінних (етанол + глюкоза) субстратів зумовлено посиленням глюконеогенезу, про що свідчило функціонування двох анаплеротичних шляхів (гліоксилатного циклу і піруваткарбоксилазної реакції), а також підвищення активності фосфоенолпіруватсинтетази порівняно з культивуванням бактерій на відповідних моносубстратах. It has been established that under the conditions of mixotrophic growth of Acinetobacter sp. B-7005 on the mixture of sodium acetate and glucose the activity of acetyl-KoA-synthetase and that of phosphoenolpyruvate synthetase were 10 times lower and indices of synthesis of microbial exopolysaccharide (EPS) ethapolan are almost 2 times lower than on the mixture of potassium acetate and glucose. It is supposed that the positive role of sodium cations may consist in their participation in the active transport of acetate to the cells of Acinetobacter sp. B-7005. An increase of ethapolan synthesis when the producer is grown on the mixture of energy-deficient (acetate + glucose) and energetically nonequivalent (ethanol + glucose) substrates is determined by the intensification of gluconeogenesis, that is evidenced by the functioning of two anaplerotic paths (glioxylate cycle and pyruvate-carboxy lase reaction), as well as the increase of activity of phosphoenolpyruvate synthetase compared with cultivation of bacteria on the corresponding monosubstrates.Документ Вдосконалення біотехнології мікробного екзополісахариду етаполану на етанолі(2008) Пирог, Тетяна Павлівна; Корж, Юлія МиколаївнаВизначено особливості енергетичного й конструктивного метаболізму С2-субстратів у Acinetobacter sp. В-7005 – продуцента екзополісахариду етаполану, виявлено сайти метаболічного лімітування і розроблено підходи до їхнього усунення.Показано, що „вузьким” місцем метаболізму етанолу у Acinetobacter sp. В-7005 є асиміляція ацетату: реакція, що каталізується ацетил-КоА-синтетазою є швидкість-лімітувальною. Встановлено умови культивування бактерій, що дають змогу усунути лімітування С2-метаболізму і підвищити у три рази активність ацетил-КоА-синтетази. За таких умов синтезується високоацильований етаполан зі ступенем ацилювання 3 – 15%. Середня молекулярна маса полісахариду становить 1,5 млн і не змінюється в процесі виділення й очистки препарату. Підвищений вміст жирних кислот і висока молекулярна маса етаполану зумовлюють покращення реологічних властивостей його розчинів, що визначають практичну значущість цього полісахариду. The study is devoted to investigating of the basic stages of С2-compounds assimilation in Аcinetobacter sp. В-7005, to reveal „bottleneck” of С2-metabolism and to develop of approaches to their removal to improve process of microbial exopolysaccharide ethapolan synthesis. Ethanol metabolism in Acinetobacter sp. В-7005 is limited by the rate of acetate assimilation in a reaction catalyzed by acetyl-CoA-synthetase, was shown. Basing on the investigations of С2-metabolism regulation the cultivation conditions were developed which allowed to increase the acetyl-CoA-synthetase activity in Acinetobacter sp. В-7005. Ethapolan synthesized under these conditions was characterized by high level of acylation (3 - 15%). Molecular mass of this polysaccharide was 1,5 million and was not changed during purification. Improved reological properties of ethapolan were associated with high molecular mass and increasing fatty acids content.Документ Етаполан – мікробний екзополісахарид мультифункціонального призначення(2006) Пирог, Тетяна Павлівна; Корж, Юлія МиколаївнаПідсумовано власні експериментальні дані стосовно інтенсифікації синтезу, регуляції фізико-хімічних властивостей і практичного використання мікробного екзополісахариду (ЕПС) етаполану (продуцент - Acinetobacter sp. В-7005). Етаполан складається з ацильованого (містить С10-С18-жирні кислоти) і неацильованого компонентів, ідентичних за моносахаридним складом, вмістом глюкуронової і піровиноградної кислот. Завдяки наявності жирних кислот розчинам етаполану притаманна здатність до емульгування, підвищення в’язкості в присутності катіонів, за низьких значень рН, у системі Сu2+-гліцин, що зумовлює практичне використання цього ЕПС у нафтовидобувній, хімічній, харчовій промисловості, сільському господарстві. Застосування 1 т етаполану у нафтодобуванні дає змогу отримати додатково 240 т нафти.Наведено дані про технологічні особливості біосинтезу етаполану на різних вуглецевих субстратах (етанол, вуглеводи, суміш ростових С2-С6-сполук), які дають змогу знизити у 3-4 рази (до 2,95 г/л) вміст солей у середовищі культивування продуцента, підвищити у 2-5 разів кількість синтезованого ЕПС і регулювати його фізико-хімічні властивості залежно від галузі практичного використання.Документ Регуляція С2-метаболізму в умовах міксотрофного росту Аcinetobacter sp. УКМ В-7005 на суміші етанолу і глюкози(2006) Пирог, Тетяна Павлівна; Лащук, Надія Володимирівна; Корж, Юлія МиколаївнаПоказана можливість усунення лімітування С2-метаболізму при вирощуванні Acinetobacter sp. УКМ В-7005 - продуцента екзополісахариду (ЕПС) етаполану на суміші етанолу і глюкози. Культивування бактерій на незабуференому середовищі з етанолом і глюкозою супроводжувалось зниженням рН до 5,6-4,7, зумовлене накопиченням ацетату (25-45 мМ), зниженням концентрації біомаси і ЕПС. Зменшення вмісту нітратно-амонійного джерела азоту у середовищі до 0,3 г/л і заміна його на нітратне, підвищення концентрації пантотенату кальцію до 0,0009%, катіонів калію і магнію до 100 і 5-10 мМ відповідно, використання посівного матеріалу, вирощеного на ацетаті або етанолі, зниження початкової концентрації етанолу і глюкози до 0,25-0,5 % з наступним дробним їх внесенням порціями по 0,25% у процесі культивування бактерій дало змогу попередити накопичення ацетату в культуральній рідині і реалізувати без зниження показників синтез етаполану на незабуференому середовищі. The possibility of elimination of C2-metabolism limitation under Acinetobacter sp. UCM B-7005 (producer of exopolysaccharide ethapolan) cultivation on mixture ethanol and glucose was shown. The growth of these bacteria on the inbuffered medium was accompanied by pH decrease (5,6-4,7), acetate accumulation (25-45 mM), the biomass and exopolysaccharides drop. The decrease of the ammonium nitrate content (to 0,3 g/l) in the medium, it replacement on nitrate, the increase of the pantotenate calcium concentration to 0,0009%, potassium and magnesium cations to 100 and 5-10 mM, application of the inoculum grown on acetate or ethanol, the decrease of the substrates initial concentration to 0,25 % followed by prevention of acetate accumulation and realization the ethanol synthesis on mixture of ethanol and glucose on the inbuffered medium.