Статті
Постійне посилання на розділhttps://dspace.nuft.edu.ua/handle/123456789/7372
Переглянути
7 результатів
Результати пошуку
Документ Особливості метаболізму глюкози і гліцеролу у Nocardia vaccinii ІМВ В-7405(2015) Пирог, Тетяна Павлівна; Шевчук, Тетяна Андріївна; Берегова (Покора), Христина Андріївна; Кудря, Надія ВолодимирівнаВстановлено, що глюкоза у продуцента поверхнево-активних речовин Nocardia vaccinii ІМВ В-7405 асимілюється в пентозофосфатному циклі, а також розщепленням через глюконат (активність NAD+-залежної глюкозо-6-фосфатдегідрогенази і FAD+-залежної глюкозодегідрогенази 835 ± 41 і 698 ± 35 нмоль•хв-1•мг-1 протеїну відповідно). Утворений в глюконокіназній реакції 6-фосфоглюконат залучається у пентозофосфатний цикл (активність конститутивної NADP+залежної 6-фосфоглюконат-дегідрогенази 357±17 нмоль•хв-1•мг-1 протеїну). Катаболізм гліцеролу до дигідроксіацетонфосфату (інтермедіат гліколізу) може здійснюватися двома шляхами: через гліцерол-3-фосфат (активність гліцеролкінази 244±12 нмоль•хв-1•мг-1 протеїну) і через дигідроксіацетон. Поповнення пулу С4-дикарбонових кислот у клітинах штаму ІМВ В-7405 в умовах росту як на глюкозі, так і гліцеролі відбувається у фосфоенолпіруват(ФЕП)-карбоксилазній реакції (714−803 нмоль•хв-1•мг-1 протеїну). Залучення 2-оксоглутарату до циклу трикарбонових кислот відбувається альтернативним шляхом за участю 2-оксоглутаратсинтази. Виявлена активність обох ключових ензимів глюконеогенезу (ФЕП-карбоксикінази і ФЕП-синтетази), трегалозофосфатсинтази і NADP+-залежної глутаматдегідрогенази підтвердила здатність штаму ІМВ В-7405 до синтезу поверхнево-активних гліко- та аміноліпідів відповідно. It has been established that in cells of Nocardia vaccinii IMB B-7405 (surfactant producer) glucose catabolism is performed through pentose phosphate cycle as well as through gluconate (activity of NAD+-dependent glucose-6- phosphate dehydrogenase and FAD+-dependent glucose dehydrogenase 835 ± 41 and 698 ± 35 nmol∙min-1∙mg-1 of protein respectively). 6-Phosphogluconate formed in the gluconokinase reaction is involved in the pentose phosphate cycle (activity of constitutive NADP+-dependent 6-phosphogluconate dehydrogenase 357 ± 17 nmol∙min-1∙mg-1 of protein). Glycerol catabolism to dihydroxyacetonephosphate (the intermediate of glycolysis) may be performed in two ways: through glycerol-3-phosphate (glycerol kinase activity 244 ± 12 nmol∙min‑1∙mg-1 of protein) and through dihydroxyacetone. Replenishment of the C4-dicarboxylic acids pool in N. vaccinii IMV B-7405 grown on glucose and glycerol occurs in the phosphoenolpyruvate(PEP)carboxylase reaction (714–803 nmol∙min-1∙mg-1 of protein). 2-Oxoglutarate was involved in tricarboxylic acid cycle by alternate pathway with the participation of 2-oxoglutarate synthase. The observed activity of both key enzymes of gluconeogenesis (PEP- carboxykinase and PEPsynthase), trehalose phosphate synthase and NADP+-dependent glutamate dehydrogenase confirmed the ability of IMV B-7405 strain to the synthesis of surface active glyco- and aminolipids, respectively.Документ Інтенсифікація синтезу поверхнево-активних речовин Nocardia vaccinii K-8 на гліцерині внесенням екзогенних попередників(2012) Хом'як, Д. І.; Кудря, Надія ВолодимирівнаПоказано можливість інтенсифікації біосинтезу поверхнево- активних речовин (ПАР) при культивуванні Nocardia vaccinii K-8 на гліцерині внесенням екзогенних попередників вуглеводної та ліпідної природи. Додавання глюкози (0,05 %) і соняшникової олії (0,1 %) у культуральну рідину на початку стаціонарної фази росту штаму К-8 приводить до підвищення синтезу ПАР на 45-50 % у порівнянні із показниками на середовищі без екзогенних попередників. The possibility of intensifying the biosynthesis of surface-active agents (surfactants) by culturing Nocardia vaccinii K-8 glycerin introduction of exogenous carbohydrate and lipid precursors of nature. Adding glucose (0.05%) and sunflower oil (0.1%) in the culture fluid in the early stationary growth phase of the strain K-8 leads to increased synthesis of South Africa by 45-50% in comparison with indicators on the environment without exogenous precursors.Документ Перспективи використання суміші субстратів у біотехнології(2014) Кудря, Надія Володимирівна; Берегова (Покора), Христина АндріївнаУ статті узагальнено літературні дані останніх років про використання мікроорганізмами змішаних субстратів. Значну увагу приділено підвищенню ефективності біодеградації ксенобіотиків мікроорганізмами (фенатрен, бензол, нітробензол, толуол, бупрофезін, диметоат та ін.) за наявності додаткового субстрату (глюкоза, фруктоза, сахароза, цитрат натрію). Так, за внесення крохмалю в середовищі культивування Pseudomonas sp. DFS35-4 ступінь деструкції бупрофезіну становив 75 %, а за наявності глюкози спостерігалося підвищення ступеня деструкції сульфаметаксазолу та сульфаметіазолу Rhodococcus rhodochrous 13808. Наведено літературні дані про вплив умов культивування (зокрема природи джерел вуглецю та їх концентрації у суміші) на синтез практично цінних вторинних метаболітів (клавуланова кислота, 1,3-пропандіол, біоетанол) і біомаси. This article summarizes the published data of recent years on the use of mixed substrates by microorganisms. Special attention is paid to improving the biodégradation of xenobiotics (fenatren, benzene, nitrobenzene, toluene, buprofczin, dimcthoatc, ctc.) by making additional substrate. Thus, when putting starch in the culture medium of Pseudomonas sp. DFS35-4, the degree of buprofezin destruction reached 75 %; when adding glucose, the amount of observed degradation of sulfamethoxazole and Rhodococcus rhodochrous 13808 sulfamcthizolc increased. The literary data on the impact of cultivation conditions (including natural carbon sources and their concentrations in the mixture) on the synthesis of secondary metabolites having practical value (clavulanic acid, 1.3-propanediol and ethanol) and on biomass is presented in the article.lДокумент Особливості центрального метаболізму Nocardia vaccinii ІМВ В-7405 − продуцента поверхнево-активних речовин(2014) Пирог, Тетяна Павлівна; Шевчук, Тетяна Андріївна; Берегова (Покора), Христина Андріївна; Кудря, Надія ВолодимирівнаДосліджували активність ферментів циклу трикарбонових кислот (ЦТК), анаплеротичних і деяких біосинтетичних шляхів у продуцента поверхнево-активних речовин (ПАР) Nocardia vaccinii ІМВ В-7405 за умов росту на вуглеводних (глюкоза) і невуглеводних (гліцерин) субстратах. У клітинах штаму ІМВ В-7405, вирощеного як на глюкозі, так і на гліцерині, виявлена НАДФ+-залежна ізоцитратдегідрогеназна активність (128±6 і 328±16 нмоль хв-1 мг-1 білку відповідно), а також активність НАД+- і НАДФ+-залежних малатдегідрогеназ (300−1600 нмоль хв-1 мг-1 білку). Відсутність у N. vaccinii ІМВ В-7405 активності 2-оксоглутаратдегідрогенази може свідчити про функціонування у цього штаму альтернативних шляхів залучення 2-оксоглутарату до ЦТК. Поповнення пулу С4-дикарбонових кислот у штаму ІМВ В-7405 відбувається у фосфоенолпіруват(ФЕП)-карбоксилазній реакції (650−1200 нмоль хв-1 мг-1 білку). Висока активність обох ключових ферментів глюконеогенезу (ФЕП-карбоксикінази і ФЕП-синтетази, 800−2400 нмоль хв-1 мг-1 білку) і НАДФ+-залежної глутаматдегідрогенази (300−1900 нмоль хв-1 мг-1 білку) підтвердила здатність штаму ІМВ В-7405 до синтезу поверхнево-активних гліко- та аміноліпідів відповідно. The activity of the enzymes of the tricarboxylic acid cycle (TCA) and anaplerotic and some biosynthetic pathways in producing surfactants Nocardia vaccinii ІMV B-7405 grown on a carbohydrate (glucose) and non-carbohydrate (glycerol) substrates was studied. Іn the cells of the strain ІMV B-7405 grown on both glucose and glycerol NADP+-dependent isocitrate dehydrogenase activity (6±128 and 328±16 nmol min-1 mg-1 protein, respectively), and the activity of NAD+- and NADP+-dependent malate dehydrogenase (300−1600 nmol min-1 mg-1 protein) was detected. The absence in N. vaccinii ІMV B-7405 2-oxoglutarate activity may indicate the operation in this strain of alternative ways involving 2-oxoglutarate in the TCA cycle. The filling up the pool of the C4-dicarboxylic acids in N. vaccinii ІMV B-7405 occurs in the phosphoenolpyruvate(PEP)carboxylase reaction (650−1200 nmol min-1 mg-1 protein). High activity of both key enzymes of gluconeogenesis (PEP carboxykinase and PEP synthase, 800−2400 nmol min-1 mg-1 protein) and NADP+-dependent glutamate dehydrogenase (300−1900 nmol min-1 mg-1 protein) confirmed the ability of strain ІMV B- 7405 to the synthesis of surface active glyco- and aminolipids respectively. The obtained data are the basis for the theoretical calculations of optimal molar ratio of unequal energy substrates concentrations to enhance the surfactants synthesis under N. vaccinii ІMV B-7405 cultivation on their mixture.Документ Особливості синтезу поверхнево-активних речовин Nocardia vaccinii IMB B-7405 на суміші ростових субстратів(2013) Кудря, Надія Володимирівна; Пирог, Тетяна ПавлівнаВиробництво поверхнево-активних речовин (ПАР) мікробного походження є досить перспективним напрямком у промисловості, оскільки такі сполуки мають ряд переваг перед синтетичними аналогами. ПАР можуть широко використовуватись у різноманітних галузях промисловості (природоохоронні технології, харчова промисловость, сільське господарство, медицина). Одним із підходів до підвищення їх біосинтезу є використання комбінації енергетично нерівноцінних субстратів, що дає змогу уникнути непродуктивних втрат вуглецю і енергії, а також підвищує конверсію вуглецю у біомасу чи практично цінні вторинні метаболіти. Було досліджено можливість інтенсифікації синтезу ПАР Nocardia vaccinii ІМВ В-7405 на змішаних субстратах (гексадекан і глюкоза, етанол і глюкоза, гексадекан і гліцерин, глюкоза і гліцерин). Концентрація кожного з моносубстратів у суміші становила 0,5 і 1,0 %. Після процесу культивування вимірювали показники умовної концентрації ПАР та індексу емульгування. Встановлено, що умовна концентрація ПАР на змішаних субстратах була у 2,1–3,5 рази вищою порівняно з використанням відповідних моносубстратів. Максимальні значення умовної концентрації ПАР (4,4 та 4,8, відповідно) спостерігалися у разі використання суміші глюкози з етанолом або гліцерином. Встановлено залежність показників синтезу ПАР від природи джерела вуглецю у середовищі для одержання інокуляту. Одержані результати засвідчують ефективність використання суміші ростових субстратів для одержання поверхнево-активних речовин N. vaccinii ІМВ В-7405. Production of surface-active agents (surfactants) is highly promising direction in the industry, since such connections have several advantages over synthetic analogs. Surfactants are widely used in various industries (environmental technologies, food processing, agriculture, medicine). One approach of improving their biosynthesis is the combination of unequal energy substrates, avoiding unnecessary loss of carbon and energy, and increasing the conversion of carbon in biomass or practically valuable secondary metabolites. The possibility of intensification of surfactant synthesis in Nocardia vaccinii IMB B-7405 on mixed substrates was investigated (hexadecane and glucose, ethanol and glucose, hexadecane and glycerol, glucose and glycerol). Concentration of each monosubstrate in the mixture was 0.5 and 1.0%. After cultivation process conventional surfactant concentration and emulsification index parameters were measured. Found that conventional surfactant concentration on mixed substrates was 2.1-3.5 times higher in comparison with the corresponding monosubstrates. The maximum values of conventional surfactant concentrations (4.4 and 4.8, respectively) were observed using a mixture of glucose to ethanol or glycerol. The dependence of the surfactant synthesis indexes on the nature of the carbon source in the medium for inoculum was "set. The results confirm the effectiveness of the use of a mixture of growth substrates for surfactants N. vaccinii IMB B-7405.Документ Синтез поверхнево-активних речовин Nocardia vaccinii ІМВ В-7405 на суміші меляси з етанолом і гліцерином(2014) Пирог, Тетяна Павлівна; Кудря, Надія Володимирівна; Берегова (Покора), Христина АндріївнаУ статті досліджено можливість заміни глюкози у суміші з етанолом і гліцерином для біосинтезу поверхнево-активних речовин (ПАР) Nocardia vaccinii IMB В-7405 на дешевший субстрат меляси (відхід цукрового виробництва). Встановлено залежність синтезу ПАР на суміші етанолу і меляси, гліцерину й меляси від природи джерела вуглецю у середовищі для одержання інокуляту та концентрації моносубстратів у суміші. Найвищі показники синтезу (концентрація позаклітинних ПАР 3,5—3,9 г/л,індекс емульгування культуральної рідини 59—61 %) спостерігалися за використання посівного матеріалу, вирощеного на змішаних субстратах. За таких умов культивування концентрація ПАР була в 1,3—2,7 раза вищою, ніж на відповідних моносубстратах. Підвищення концентрації моносубстратів у суміші з 0,5 до 1,0% не супроводжувалося суттєвим збільшенням показників синтезу поверхнево-активних речовин. The possibility of replacing glucose in mixture with ethanol and glycerol for biosynthesis of Nocardia vaccinii IMV B-7405 surfactants on cheaper substrate molasses (sugar production waste) was studied. The dependence of surfactants synthesis under cultivation of N. vaccinii IMV B-7405 in medium, containing mixture of ethanol and molasses, glycerol and molasses on the nature of the carbon source in the medium for the inoculum obtaining and monosubstrate concentration in the mixture was established. The highest rates of synthesis (concentration of extracellular surfactant 3,5—3,9 g/1, emulsifycation index of culture liquid 59—61 %) were observed when inoculum was grown on mixed substrates. Under such cultivation conditions of N vaccinii IMV B-7405 the surfactant concentration was 1,3—2,7 times higher than the corresponding monosubstrates. The increasing of monosubstrates concentration in mixture with 0.5 to 1.0% was not accompanied by a significant increase of surfactants synthesis.Документ Особливості метаболізму гліцерину у продуцента поверхнево-активних речовин Nocardia vaccinii ІМВ В-7405(2013) Пирог, Тетяна Павлівна; Шевчук, Тетяна Андріївна; Берегова (Покора), Христина Андріївна; Кудря, Надія ВолодимирівнаВстановлено, що в клітинах продуцента поверхнево-активних речовин (ПАР) Nocardia vaccinii ІМВ В-7405 метаболізм гліцерину до дигідроксиацетонфосфату здійснюється двома шляхами: через гліцерин-3-фосфат і через дигідроксиацетон. Окиснення гліцерину до дигідроксиацетону у штаму ІМВ В-7405 каталізується піролохіноліхінон (ПХХ)-залежною гліцериндегідрогеназою і нітрозо-N, N-диметиланілін (НДМА)- залежною алкогольдегідрогеназою (256 і 550 нмоль хв-1 мг-1 білка, відповідно). Основною анатеротичною реакцією у клітинах N. vaccinii ІМВ В-7405, в якій відбувається поповнення пулу С4-дикарбонових кислот, є фосфоенолпіруват (ФЕП)-карбоксилазна реакція (656 нмоль хв-1 мг-1 білка). Виявлена висока активність НАДФ-залежної глутаматдегідрогенази, а також ключових ферментів глюконеогенезу (ФЕП-синтетази та ФЕП-карбоксикінази), свідчить про здатність штаму ІМВ В-7405 до синтезу поверхнево-активних аміно- і гліколіпідів. Отримані дані є основою для теоретичних розрахунків оптимального молярного співвідношення концентрації енергетично нерівноцінних субстратів для підвищення синтезу ПАР N. vaccinii ІМВ В-7405 на їх суміші. It was shown that Nocardia vaccinii IMV B-7405, which is asurface-active substances (SAS) producer, converts glycerol to dihydroxyacetonephosphate (DHAP) via two metabolic pathways: through the glycerol-3-phosphate and through dihydroxyacetone. In strain IMV B-7405, the oxidation of glycerol into dihydroxyacetone is catalyzed by pyrroloquinoline quinone-dependent (PQQ- dependent) glycerol dehydrogenase and N, N-dimethy-nitrosaminedependent (NDMA-dependent) alcohol dehydrogenase (256 and 550 nmol min-1mg-1 of protein, respectively). It should be mentioned that under the growth of N. vaccinii IMV B-7405 in medium with glycerol, the main anaplerotic reaction for refilling the pool of C4-dicarboxylic acids is phosphoenolpyruvate (PEP)-carboxylase reaction (656 nmol min-1mg-1 of protein). The revealed high activity of glutamate dehydrogenase and key enzymes of gluconeogenesis indicates the ability of N. vaccinii IMV B-7405 to synthesize surface-active amino- and glycollipids from glycerol. The obtained data could be the basis for theoretical calculations of the optimal molar ratio of energy unequivalent substrates concentrations in order to increase the synthesis of SAS of N. vaccinii IMV B-7405 on their mixture.