Статті
Постійне посилання на розділhttps://dspace.nuft.edu.ua/handle/123456789/7372
Переглянути
12 результатів
Результати пошуку
Документ Роль фосфоенолпіруваткарбоксилази у синтезі поверхнево-активних речовин Acinetobacter calcoaceticus К-4(2011) Пирог, Тетяна Павлівна; Шевчук, Тетяна Андріївна; Долотенко, Є. Ю.Встановлено, що під час культивування Acinetobacter calcoaceticus К-4 на середовищі з етанолом і сечовиною показники синтезу поверхнево-активних речовин, активність фосфоенолпіруват(ФЕП)-карбоксилази (ферменту анаплеротичної реакції, що функціонує у мікроорганізмів за умов росту на вуглеводних субстратах), а також ферментів глюконеогенезу (ФЕП-синтетази і ФЕП-карбоксикінази) були у 1,5-3 рази вищими порівняно з використанням нітратного джерела азотного живлення. Обговорюється фізіологічна роль ФЕП-карбоксилази у процесі вирощування A. calcoaceticus К-4 на середовищі з етанолом і сечовиною як спосіб знешкодження вуглекислого газу, утворюваного в уреазній реакції, що в свою чергу супроводжується підвищенням у клітинах бактерій пулу С4-дикарбонових кислот, посиленням глюконеогенезу і збільшенням синтезу поверхнево-активних гліколіпідів. It has been established that under cultivation of Acinetobacter calcoaceticus K-4 on the medium with ethanol and urea the indices of surfactants synthesis, activity of phosphoenolpyruvate (PEP) carboxylase (enzyme of anaplerotic reaction functioning in microorganisms under growth on carbohydrate substrates), as well as the enzymes of gluconeogenesis (PEP-synthetase and PEP carboxykinase) were 1,5-3 times higher as compared with the use of nitrate source of nitrogen nutrition. Physiological part of PEP-carboxylase when growing A. calcoaceticus K-4 on the medium with ethanol and urea as a method of neutralization of carbon dioxide by increasing a pool of C4-dicarbonic acids in the bacterial cells, by intensification of gluconeogenesis and synthesis of surface-active glycolipids.Документ Регуляция синтеза экзополисахаридов Acinetobacter sp. на среде с этанолом(1993) Малашенко, Юрий Романович; Пирог, Татьяна Павловна; Гринберг, Тамара Александровна; Пинчук, Григорий ЭфроимовичИзучено влияние С4-дикарбоновых кислот на процесс синтеза экзополисахаридов (ЭПС) Acinetobacter sp. при росте бактерий на среде с этанолом. Внесение в среду культивирования, содержащую этанол, С4-дикарбоновых кислот — интермедиатов метаболизма этанола — приводит к усилению глюконеогенеза и увеличению количества синтезированных ЭПС. Разработана технология получения ЭПС на основе этанола, позволяющая повысить в 4—5 раз продуктивность процесса биосинтеза ЭПС. Экзополисахариды, синтезированные на средах с этанолом и этанолом с добавлением С4-дикарбоновых кислот, различаются между собой по химическому составу. C4-dicarbonic acids have been studied for their effect on synthesis of exopolysaccharides (EPS) by Acinetobacter sp., while growing bacteria on the medium with ethanol, Introduction of C4-dicarbonic acids, intermediates of ethanol metabolism, into the ethanol-containing- cultivation medium intensifies gluconeogenesis and increases the amount of synthesized EPS. Developed technology of EPS production from ethanol permits making the productivity of the EPS biosynthesis process 4-5 times higher. Exopolysaccharides synthesized on the medium with ethanol or ethanol with addition of C4-dicarbonic acids differ in their chemical composition.Документ Особливості метаболізму під час вирощування Acinetobacter sp. В-7005 на суміші ростових С2-С6-субстратів(2007) Пирог, Тетяна Павлівна; Корж, Юлія Миколаївна; Висятецька, Надія ВолодимирівнаВстановлено, що в умовах міксотрофного росту Acinetobacter sp. В-7005 на суміші ацетату натрію і глюкози активність ацетил-КоА-синтетази і фосфоенолпіруватсинтетази були у 10 разів, а показники синтезу мікробного екзополіцукриду (ЕПЦ) етаполану майже у 2 рази нижчими, ніж на суміші ацетату калію і глюкози. Припускається, що позитивна роль катіонів натрію може полягати в їх участі у активному транспорті ацетату в клітини Acinetobacter sp. В-7005. Підвищення синтезу етаполану у разі вирощування продуцента на суміші енергетично дефіцитних (ацетат + глюкоза) і енергетично нерівноцінних (етанол + глюкоза) субстратів зумовлено посиленням глюконеогенезу, про що свідчило функціонування двох анаплеротичних шляхів (гліоксилатного циклу і піруваткарбоксилазної реакції), а також підвищення активності фосфоенолпіруватсинтетази порівняно з культивуванням бактерій на відповідних моносубстратах. It has been established that under the conditions of mixotrophic growth of Acinetobacter sp. B-7005 on the mixture of sodium acetate and glucose the activity of acetyl-KoA-synthetase and that of phosphoenolpyruvate synthetase were 10 times lower and indices of synthesis of microbial exopolysaccharide (EPS) ethapolan are almost 2 times lower than on the mixture of potassium acetate and glucose. It is supposed that the positive role of sodium cations may consist in their participation in the active transport of acetate to the cells of Acinetobacter sp. B-7005. An increase of ethapolan synthesis when the producer is grown on the mixture of energy-deficient (acetate + glucose) and energetically nonequivalent (ethanol + glucose) substrates is determined by the intensification of gluconeogenesis, that is evidenced by the functioning of two anaplerotic paths (glioxylate cycle and pyruvate-carboxy lase reaction), as well as the increase of activity of phosphoenolpyruvate synthetase compared with cultivation of bacteria on the corresponding monosubstrates.Документ Роль екзогенних попередників в утворенні поверхнево-активних речовин за умов культивування Rhodococcus erythropolis ЕК-1 на етанолі(2008) Пирог, Тетяна Павлівна; Корж, Юлія Миколаївна; Шевчук, Тетяна Андріївна; Тарасенко, Д. О.Показана можливість інтенсифікації синтезу поверхнево-активних речовин (ПАР) штамом Rhodococcus erythropolis ЕК-1 за наявності у середовищі з етанолом цитрату (регулятора синтезу ліпідів) і фумарату (попередника глюконеогенезу). Збільшення на 40–100 % показників синтезу ПАР за умови внесення цитрату (0,1 %) і фумарату (0,2 %) на початку стаціонарної фази росту продуцента зумовлене активацією глюконеогенетичної гілки обміну і посиленням синтезу ліпідів, про що свідчило підвищення у 1,4-1,5 і 3,4–3,6 раза активності ізоцитратліази і фосфоенолпіруватсинтетази, відповідно, а також зниження у1,5–1,6 раза активності ізоцитратдегідрогенази. A possibility to intensify synthesis of surfactants of Rhodococcus erythropolis EK-1 under the presence of citrate (lipid synthesis regulator) and fumarate (gluconeogenesis precursor) has been shown. A 40—100 % increase of indices of surfactants synthesis with introduction of cytrate (0.1 %) and fumerate (0.2 %) in the beginning of the stationary producer growth phase is determined by activation ofgluconeogenetic branch of metabolism and by intensification of lipids synthesis that was evidenced by the 1.4—1.5-fold and 3.4—3.6-fold increase of isocitrate liase and phosphoenolpyruvate synthetase activities, respectively, as well as by a 1.5—1,6-fold decrease of activity of isocitrate dehydrogenase.Документ Влияние способа приготовления посевного материала на синтез экзополисахарида этаполана(2005) Пирог, Татьяна Павловна; Корж, Юлия Николаевна; Лащук, Надежда ВладимировнаИсследована зависимость уровня синтеза микробного экзополисахарида этаполана при культивировании Acinetobacter sp. на средах с различными субстратами (этанол, ацетат, глюкоза, этанол+глюкоза) от способа получения посевного материала. Увеличение синтеза ЭПС на среде с глюкозой при использовании инокулята, выращенного на этанол- или ацетатсодержащей среде, обусловлено индукцией глюконеогенеза, о чем свидетельствует повышение активности ферментов глиоксилатного цикла (изоцитратлиазы и малатсинтазы), а также ключевого фермента глюконеогенеза фосфоенолпируватсинтетазы. Применение посевного материала, выращенного с использованием ацетата, при культивировании Acinetobacter sp. В-7005 на среде, содержащей этанол или смесь этанола и глюкозы, сопровождалось устранением ограничений по включению ацетата в бактериальный метаболизм, повышением активности ацетил-КоА-синтетазы, изоцитратлиазы, малатсинтазы и увеличением синтеза ЭПС. Обсуждаются возможные механизмы повышения активности ацетил-КоА-синтетазы при использовании инокулята, выращенного на среде с ацетатом. The microbial exopolysaccharide (EPS) ethapolane synthesis by Acinelobacier sp. on different substrates (ethanol, acetate, glucose, glucose+ethanol) has been investigated as a function of a method for inoculum preparation. The increase in the EPS synthesis on a medium with glucose using the inoculum grown on ethanol or acetate was caused by the gluconeogenesis induction. This was confirmed un increase in the activities of glyoxylate cycle (isicitrate and malate synthase) and a key enzyme of gluconeogenesis, phosphoenolpyruvate synthetase Use of the inoculum grown on acetate for culturing Acinetobactei sp. on ethanol or a mixture of ethanol and glucose was accompanied with the following evidence. The limitations in acetate metabolism in the bacteria were eliminated, the activities of ace- tyl-CoA synthetase, isocitrate lyase, malate synthase grew, and the EPS synthesis augmented. Possible mechanisms of the enhanced acetyl-CoA synthetase activity using the inoculum grown or acetate are discussed.Документ Особенности C2-метаболизма и интенсификация синтеза поверхностно-активных веществ у штамма Rhodococcus erythropolis EK-1, растущего на этаноле(2008) Пирог, Татьяна Павловна; Корж, Юлия Николаевна; Шевчук, Татьяна Андреевна; Тарасенко, Д. А.Окисление этанола у штамма Rhodococcus erythropolis ЭК-1 – продуцента поверхностно-активных веществ (ПАВ), осуществляется 4-нитрозо-N,N-диметиланилин (НДМА)-зависимой алкогольдегидрогеназой, окисление ацетальдегида – НАД+- и НАДФ+-зависимыми дегидрогеназами с оптимумом рН 9.5, окисление ацетата – ацетаткиназой и ацетил-КоА-синтетазой. При росте на этаноле в клетках R. erythropolis ЭК-1 функционирует как глиоксилатный цикл, так и полный цикл трикарбоновых кислот, синтез фосфоенолпирувата (ФЕП) обеспечивается двумя ключевыми ферментами глюконеогенеза – ФЕП-карбоксикиназой и ФЕП-синтетазой. Внесение в среду культивирования R. erythropolis ЭК-1, содержащую 2 % этанола, цитрата (0.1 %) и фумарата (0.2 %) сопровождалось усилением глюконеогенеза, что подтверждается повышением в 1.5 и 3.5 раза активности изоцитратлиазы и ФЕП-синтетазы (ключевых ферментов глиоксилатного цикла и глюконеогенетической ветви обмена веществ соответственно), а также синтеза липидов, о чем может свидетельствовать снижение в 1.5 раза активности изоцитратдегидрогеназы. В присутствии фумарата и цитрата показатели синтеза ПАВ штаммом R. erythropolis ЭК-1 на этаноле повышались на 40–100 %. Oxidation of ethanol, acetaldehyde, and acetate in Rhodococcus erythropolis EK-1, producer of surface-active substances (SAS), is catalyzed by N,N-dimethyl-4-nitrosoaniline (DMNA)-dependent alcohol dehydrogenase, NAD+/NADP+-dependent dehydrogenases (optimum pH 9.5), and acetate kinase/acetyl-CoAsynthetase, respectively. The glyoxylate cycle and complete tricarboxylic acid cycle function in the cells of R. erythropolis EK-1 growing on ethanol; the synthesis of phosphoenolpyruvate (PEP) is provided by the two key enzymes of gluconeogenesis, PEP carboxykinase and PEP synthetase. Introduction of citrate (0.1%) and fumarate (0.2%) into the cultivation medium of R. erythropolis EK-1 containing 2% ethanol resulted in the 1.5- and 3.5-fold increase in the activities of isocitrate lyase and PEP synthetase (the key enzymes of the glyoxylate cycle and gluconeogenesis branch of metabolism, respectively) and of lipid synthesis, as evidenced by the 1.5-fold decrease of isocitrate dehydrogenase activity. In the presence of fumarate and citrate, the indices of SAS synthesis by strain R. erythropolis EK-1 grown on ethanol increased by 40–100%.Документ Особенности синтеза экзополисахарида этаполана на смеси энергетически дефицитных ростовых субстратов(2007) Пирог, Татьяна Павловна; Высятецкая, Надежда Владимировна; Корж, Юлия НиколаевнаПоказана возможность интенсификации синтеза микробного экзополи-сахарида этаполана (продуцент - Acinetobacter sp. В-7005) на смеси энергетически дефицитных ростовых субстратов (ацетат+глюкоза). При росте бактерий на смешанном субстрате оба субстрата потребляются одновременно, причем ацетат поглощается путем активного транспорта с использованием энергии протондвижущей силы. При наличии ацетата натрия в смешанном субстрате активность ацетил-КоА-синтетазы и ключевого фермента глюконеогенеза фосфоенолпируватсинтетазы были более, чем в 10 раз, а показатели синтеза этаполана почти в 2 раза выше по сравнению с ацетатом калия. Эти результаты могут свидетельствовать об участии Na+ в создании ионных градиентов на мембране, необходимых для генерации энергии протондвижущей силы. Одновременное функционирование глиоксилатного цикла и пируваткарбоксилазной реакции, повышение активности изоцитратлиазы, малатсинтазы и фосфоенолпируватсинтетазы свидетельствуют об усилении глюконеогенеза и изменении направленности процессов биосинтеза на смеси ацетата и глюкозы в сторону образования углеводов по сравнению с выращиванием Acinetobacter sp. В-7005 на соответствующих моносубстратах. Intensification of the synthesis of the microbial exopolysaccharide ethapolan by Acinetobacter sp. B-7005 was shown to occur on a mixture of energy-deficient growth substrates (acetate + glucose). When the bacterium grew on the substrate mixture, both substrates were utilized simultaneously; acetate was taken up by means of active transport at the expense of the energy of the proton-motive force. When acetate was present in the form of a sodium salt, the activities of acetyl-CoA synthetase and phosphoenolpyruvate synthetase (the key enzyme of gluconeogenesis) were tenfold higher than in the presence of potassium acetate, and the indexes of ethapolan synthesis were two times higher. The positive effect of Na+ on ethapolan synthesis is supposed to consist in the creation of ion gradients on the membrane, necessary for the generation of the proton-motive force. Simultaneous functioning of the glyoxylate cycle and pyruvate carboxylase reaction, as well as an increase in the activity of isocitrate lyase, malate synthase, and phosphoenolpyruvate synthetase, provide evidence of increased gluconeogenesis in the presence of the acetate + glucose mixture (as compared to gluconeogenesis on the corresponding monosubstrates).Документ Особенности центрального метаболизма штамма Acinetobacter sp., растущего на этаноле(2003) Пирог, Татьяна Павловна; Кузьминская, Ю. В.В клетках выращенного на этаноле мутантного штамма Acinetobacter sp. 1НГ, не образующего экзополисахариды, определена активность ферментов цикла трикарбоновых кислот (ЦТК) и некоторых биосинтетических путей. Несмотря на наличие обоих ключевых ферментов глиоксилатного цикла (изоцитратлиазы и малатсинтазы) у Acinetobacter sp. функционирует полный ЦТК, который выполняет преимущественно биосинтетическую роль. Об этом свидетельствовала высокая активность изоцитратдегидрогеназы (КФ 1.1.1.42.), глутаматдегидрогеназы (КФ 1.4.1.2. и КФ 1.4.1.4.) и низкая активность 2-оксоглутаратдегидрогеназы (КФ 1.2.4.2.). При росте Acinetobacter sp. на этаноле образование пирувата происходит в оксалоацетатдекарбоксилазной реакции (КФ 4.1.1.3.), а синтез фосфоенолпирувата (ФЕП) обеспечивается двумя ключевыми ферментами глюконеогенеза – ФЕП-карбоксикиназой (КФ 4.1.1.49.) и ФЕП-синтазой (КФ 2.7.9.1.), соотношение которых менялось при переходе бактерий из экспоненциальной в стационарную фазу роста. При внесении в этанолсодержащую среду С4-дикарбоновых кислот (фумарата калия) в 1,5-2 раза увеличивалась активность ферментов глиоксилатного цикла, а также фумаратгидратазы (КФ 4.2.1.2.), малатдегидрогеназы (КФ 1.1.1.37. и КФ 1.1.1.82.) и ФЕП-синтазы. Более заметным (почти в 7,5 раз) было повышение в этих условиях ФЕП-карбоксикиназной активности. Полученные результаты являются основой для усовершенствования технологии получения микробного экзополисахарида этаполана на С2-субстратах. Ethanol-grown cells of the mutant Acinetobacter sp. strain 1NG, incapable of producing exopolysaccharides, were analyzed for the activity of enzymes of the tricarboxylic acid (TCA) cycle and some biosynthetic pathways. In spite of the presence of both key enzymes (isocitrate lyase and malate synthase) of the glyoxylate cycle, these cells also contained all enzymes of the TCA cycle, which presumably serves biosynthetic functions. This was evident from the high activity of isocitrate dehydrogenase and glutamate dehydrogenase and the low activity of 2-oxoglutarate dehydrogenase. Pyruvate was formed in the reaction catalyzed by oxaloacetate decarboxylase, whereas phosphoenolpyruvate (PEP) was synthesized by the two key enzymes (PEP carboxykinase and PEP synthase) of gluconeogenesis. The ratio of these enzymes was different in the exponential and the stationary growth phases. The addition of the C4-dicarboxylic acid fumarate to the ethanolcontaining growth medium led to a 1.5- to 2-fold increase in the activity of enzymes of the glyoxylate cycle, as well as of fumarate hydratase, malate dehydrogenase, PEP synthase, and PEP carboxykinase (the activity of the latter enzyme increased by more than 7.5 times). The data obtained can be used to improve the biotechnology of production of microbial exopolysaccharide ethapolan on C2-substrates.Документ Метаболізм С2-С6-субстратів в умовах міксотрофного росту штамів Аcinetobacter sp. В-7005 та В-7005 (1НГ)(2004) Пирог, Тетяна Павлівна; Кузьмінська, Ю. В.; Коваленко, М. О.Досліджено активність ключових ферментів С2-С6-метаболізму при вирощуванні штамів Acinetobacter sp. В-7005 та В-7005 (1НГ) на суміші етанолу і глюкози. В умовах міксотрофного росту бактерій активність ферментів метаболізму етанолу (НАД+-залежної алкогольдегідрогенази, НАДФ+-залежної ацетальдегіддегідрогенази, ацетил-КоА-синтетази) і ферментів метаболізму глюкози (6-фосфофруктокінази та 6-фосфоглюконатдегідратази) була нижчою, ніж на відповідних моносубстратах. Більш помітним (у порівнянні з культивуванням на етанолі) було зниження активності ізоцитратліази і малатсинтази, що може свідчити про незначну роль гліоксилатного циклу в метаболізмі бактерій при рості на суміші С2-С6-субстратів. Одночасне функціонування гліоксилатного циклу і піруваткарбоксилазної реакції, підвищення активності фосфоєнолпіруватсинтетази свідчать про посилення глюконеогенезу в умовах міксотрофного росту Acinetobacter sp. В-7005 та В-7005 (1НГ). Activities of the key enzymes of С2-С6-metabolism were assayed under cultivation of Acinetobacter sp. В-7005 and B-7005 (1 НГ) strains on ethanol and glucose mixture. Under mixotrophic growth of bacteria the enzymes activity of ethanol metabolism (NAD+-dependent alcohol dehydrogenase, NADP+-dependent acetaldehyde dehydrogenase, acetyl-KoA-synthetase) and glucose metabolism (6-phosphofructokinase and 6-phosphogluconate dehydratase) was lower than on corresponding monosubstrates. The activity of isocitrate lyase and malate synthase in cells grown on the substrate mixture declined to an even greater extent, indicating that the role of the glyoxylate cycle in such cells is insignificant. The simultaneous functioning of the glyoxylate cycle and pyruvate carboxylase reaction, increasing of phosphoenolpyruvate synthetase testify to the gluconeogenesis intensification under mixotrophic growth of Acinetobacter sp. В-7005 and B-7005 (1 НГ).Документ Some characteristics of central metabolism in Acinetobacter sp. grown on ethanol(2003) Pirog, Tatiana; Kuzminska, Yu.Ethanol-grown cells of the mutant Acinetobacter sp. strain 1NG, incapable of producing exopolysaccharides, were analyzed for the activity of enzymes of the tricarboxylic acid (TCA) cycle and some biosynthetic pathways. In spite of the presence of both key enzymes (isocitrate lyase and malate synthase) of the glyoxylate cycle, these cells also contained all enzymes of the TCA cycle, which presumably serves biosynthetic functions. This was evident from the high activity of isocitrate dehydrogenase and glutamate dehydrogenase and the low activity of 2-oxoglutarate dehydrogenase. Pyruvate was formed in the reaction catalyzed by oxaloacetate decarboxylase, whereas phosphoenolpyruvate (PEP) was synthesized by the two key enzymes (PEP carboxykinase and PEP synthase) of gluconeogenesis. The ratio of these enzymes was different in the exponential and the stationary growth phases. The addition of the C4-dicarboxylic acid fumarate to the ethanolcontaining growth medium led to a 1.5- to 2-fold increase in the activity of enzymes of the glyoxylate cycle, as well as of fumarate hydratase, malate dehydrogenase, PEP synthase, and PEP carboxykinase (the activity of the latter enzyme increased by more than 7.5 times). The data obtained can be used to improve the biotechnology of production of microbial exopolysaccharide ethapolan on C2-substrates.